浙江大学发明高效筛选非转基因“编辑”植株方法(CRISPR-S)

作者:谷丰光电 来源: 时间:2017-07-18 09:56:32 次数:

浙江大学农学院作物所舒庆尧教授团队在Plant Biotechnology Journal在线发表的研究论文。

近日,浙江大学农学院作物所舒庆尧教授团队在Plant Biotechnology Journal在线发表了题为“CRISPR-S: an active interference element for a rapid and inexpensive selection of genome-edited, transgene-free rice plants”的研究论文。该研究在现有CRISPR载体pHun4c12基础上,通过一个RNAi新元件创制了一种快速、高效、低成本筛选无转基因成分基因编辑植株的新方法。


浙江大学发明高效筛选非转基因“编辑”植株方法(CRISPR-S)

Figure 1. Production of genome-edited, transgene-free rice plants.


CRISPR/Cas9基因编辑技术操作简单,在作物精准育种上有着重大应用前景。CRISPR技术除了实现定点编辑之外,最大的优势在于可通过自交使T-DNA与编辑位点分离,获得无转基因成分的改良植株。传统方法是通过PCR来鉴定T-DNA,步骤繁琐,工作量大,且易因PCR失败而造成假阴性。

该研究团队将CRISPR载体与RNAi技术相结合,构建了一种新的基因编辑载体pHun4c12s,该RNAi元件的表达会沉默水稻内源基因,从而表现出性状,既可用于T0代编辑植株的选择,也可在后代中剔除携带转基因成分的植株,从而大幅提高了对不含转基因的编辑植株的筛选效率,降低了经济成本。在该文中,以苯达松除草剂抗性基因CYP81A6为例进行了实验验证。将T0代植株分蘖期分成2半,1半喷施苯达松,实验中表现敏感的均为编辑成功的单株;T1代群体中,携带T-DNA植株因CYP81A6 RNAi作用而对苯达松敏感,从而表现出致死症状,而存活下来的植株则不带T-DNA,这一新技术体有望推动基因编辑在农作物育种中的应用。


该研究由浙江大学作物所舒庆尧教授团队完成,博士后芦海平为论文第一作者。相关工作得到了浙江科技厅、湖北省主要粮食作物协同创新中心、浙江大学大北农学科发展与人才培养基金等的资助。


来源:植物科学最前沿

文献出处:

Plant Biotechnol J. 2017 July 8

CRISPR-S: an active interference element for a rapid and inexpensive selection of genome-edited, transgene-free rice plants